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頂刊研究!微電極陣列實現(xiàn)心臟類器官360°電生理信號采集分析

更新時間:2025-10-20點擊次數(shù):230
在心血管疾病研究領域,人類誘導多能干細胞(iPSC)衍生的心臟類器官因其能模擬心臟早期發(fā)育和疾病特征而備受關注。然而,傳統(tǒng)二維微電極陣列僅能記錄平面信號,無法捕捉心臟類器官中電信號的三維傳播動態(tài),限制了其在心律失常等復雜疾病建模中的應用。

近日,約翰斯·霍普金斯大學科研團隊成功開發(fā)出具有可編程特性的形狀自適應殼裝微電極陣列(shell MEA),實現(xiàn)了對三維心臟類器官(Cardiac Organoids)的高時空分辨率電生理信號采集與分析。該成果以"3D Spatiotemporal Electrophysiology of Cardiac Organoids Using Shell Microelectrode Arrays"為題發(fā)表在國際頂級期刊《Advanced Materials》上。

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01

技術背景與創(chuàng)新設計
臟類器官通過自組裝形成具有腔室樣結構的微組織,能夠自發(fā)跳動并模擬心臟的電生理特性。然而,傳統(tǒng)電生理記錄技術如二維微電極陣列或膜片鉗存在明顯不足:二維陣列僅能捕獲類器官基底表面的信號,而膜片鉗需要解離類器官,破壞其三維結構且無法進行長期觀測。光學成像技術雖能提供部分時空信息,但易受光漂白和光毒性影響,且穿透深度有限。

研究團隊基于自折疊雙分子層原理,設計了一種shell MEA。該陣列由四個十字形片段組成,可在水溶液中自主折疊成籠狀結構,包裹整個類器官表面,其光學透明性允許同時進行鈣離子成像,驗證電生理傳播模式。其核心創(chuàng)新包括:
  • 定制化幾何結構:可調整電極布局,適應不同尺寸(0.5–1.5 mm直徑)的類器官;
  • 高密度電極分布:16個電極均勻覆蓋類器官上、中、下區(qū)域,確保全表面信號采集。

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圖1. shell MEA3D打印微孔集成用于心臟類器官封裝。

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制造技術與性能優(yōu)化
shell MEA的制造采用五層光刻掩模工藝,在石英晶圓上逐層沉積鍺犧牲層、SU-8絕緣層、金電極和導電聚合物PEDOT:PSS涂層。通過調控SU-8雙分子層的交聯(lián)度和厚度,可實現(xiàn)可控的折疊角度和時間。

團隊采用摩方精密microArch® S240 (精度:10μm)高精度3D打印機和生物相容性樹脂(BIO)材料制造定制化微孔板,確保類器官精準定位到 shell MEA中心。微孔板通過UV固化后,與shell MEA基底牢固粘合,形成完整的檢測系統(tǒng)。這一技術突破避免了傳統(tǒng)手動操作的誤差,為高通量應用奠定了基礎。

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圖2. shell MEA制備及電化學特性表征。

03

長期監(jiān)測與藥物響應分析
為驗證殼層MEA在心臟毒性篩選中的應用潛力,團隊測試了9天內異丙腎上腺素(正性肌力藥物)、E-4031(hERG通道阻滯劑)和血清素對心肌類器官電生理參數(shù)的影響:
  • 異丙腎上腺素(10 μM)導致場電位振幅增加81%、跳動頻率上升84%、場電位持續(xù)時間延長12%,符合其正性變時和變力作用;
  • E-4031(1 μM)引起頻率下降34%、持續(xù)時間延長64%,模擬了心律失常風險;這些結果與臨床前數(shù)據一致,驗證了 shell MEA在藥物心臟毒性評估中的可靠性。

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圖3. shell MEA的特性分析,用于優(yōu)化心臟類器官的電生理記錄。

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圖4. 連續(xù)記錄與藥理響應監(jiān)測。

04


三維激活映射與傳導速度分析
通過檢測局部激活時間(LAT),團隊生成了高分辨率三維等時線圖。基于最大斜率法(非振幅法)的LAT檢測準確率達87.5%,顯著優(yōu)于傳統(tǒng)方法(69.6%)。插值算法(徑向基函數(shù))將16個電極數(shù)據轉化為全表面激活序列,揭示類器官內電信號傳播路徑(如從左至右,延遲約15 ms)。

更重要的是,殼層MEA的透明性允許同步鈣成像驗證。對比顯示,三維電生理映射與鈣成像激活圖高度相關,但三維映射測得的傳導速度(CV)更高。這種差異源于鈣成像的時空分辨率限制及二維投影的片面性,突顯了三維全表面記錄的優(yōu)勢。

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圖5. 自發(fā)性跳動的心臟類器官的三維活化映射。


在異丙腎上腺素處理后,三維CV映射進一步顯示傳導加速(均值從5.12升至6.28 cm/s),且傳播模式呈現(xiàn)區(qū)域異質性,提示類器官內細胞類型分布不均。這種空間分辨能力為研究心律失常機制(如傳導阻滯或折返)提供了新工具。


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圖6. 3D傳導速度映射及與鈣成像的一致性驗證。


總結:研究團隊開發(fā)的殼層微電極陣列技術,通過全表面三維電生理映射,解決了心臟類器官研究中的關鍵瓶頸。其創(chuàng)新設計、長期監(jiān)測能力及多模態(tài)集成優(yōu)勢,為心臟疾病建模和藥物測試提供了更精準、高效的平臺。這一突破不僅推動了類器官技術的功能化進展,還可擴展至腦類器官、骨骼肌類器官等電活性組織模型。其高通量制造潛力(晶圓級加工)與微機電系統(tǒng)(MEMS)兼容性,為大規(guī)模藥物篩選和個性化醫(yī)療奠定基礎。


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